发布日期:2024-10-06 04:56 点击次数:122
两性电解质(pH6-9)91porn.com
家具储存:2-8℃、避光
家具称号:Ampholyte
家具践诺:
家具线路:
两性电解质即是既能当酸又能当碱用的电解质。常常为两性元素的氧化物的水合物、氨基酸等。两性电解质在大于其等电点的 pH 环境中解离成带负电荷的阴离子,向电场的正极泳动;在小于其等电点的 pH环境中解离成带正电荷的阳离子,向电场的负极泳动。这种泳动只须在等于其等电点的 pH 环境中,即卵白质所带的净电荷为零时才调罢手。两性电解质适用于植物卵白的等电聚焦。
凝胶融化:
1. 30%酰胺(Acr-Bis):30 g 酰胺+1.5 g 烯酰胺加水至 100 mL,定溶后过滤。
2. 甘-T:23mL 丙三醇+0.5 mL TRITON 加水至 100 mL。
3. 1%四甲基(TEMED):1 mL TEMED 加水至 100 mL。
4. 1%酸铵(AP):1 g 酸铵加水至 100 mL。
5. 顺丁烯二酸缓冲液:3.08 g 化钠+5.8 g 顺丁烯二酸加水至 100 mL。
6. 1%α-萘脂:1 g 醋酸-α-萘脂加 100 mL 正丁醇。
7. 7%冰乙酸:70 mL 冰乙酸加水至 1000 mL。
电泳操作:
(1)样品贬责
浸泡:先将所需果决的种子浸泡一段时刻,以备取胚使用。
取胚:用镊子把种子的胚取出,放入 0.5 或 1.5mL 离心管内。
研磨:在离心管内加入 0.1 mL 蔗糖提真金不怕火液,然后将胚研成匀浆,放入雪柜保存。
(2)凝胶制备
1. 配制凝胶前,应把玻璃板准备好。行将两块干净的玻璃板叠放在沿路,之间夹上所需凝胶厚度的胶条进行四边密封,一端留有小口用来凝胶。然后用文具夹奖玻璃板四周固定好。夺目夹子作在胶条正中,以防漏胶。
2. 配制凝胶时,先将所需贮备液自雪柜中取出放手室温。
3. 将各式贮备液体按一定比例搀杂(见表 1)终末加入 0.5 mL 1%过铵,搅动均匀。然后用打针器吸净搀杂液,摒除气泡,冉冉注入玻璃板的夹隙内。
4. 将注入搀杂液的玻璃板静置放好,隔夜使用。
电泳:
1. 制胶板:将胶板取出,揭去表层的玻璃板和胶条,然后用蒸馏水轻轻冲洗一下胶面。
2. 点样:将浸入电极的滤纸条取出,压半较胶放在胶板上,然后放入电泳槽内,夺目正负极相吻合。将电泳槽平置于雪柜内(电泳时的温度一般在 0~4℃雪柜中进行),接通电源,把电泳仪调至电压 50 V,电泳以每板胶不擢升 17 mA 为准,然后运行电泳。进样时刻一般在 1.5~2 小时。
3. 揭样纸:待电流降至每板胶 3 mA 以下时,堵截电源取出胶板,揭去样纸 200-320V 继续电泳。
情欲印象bt4. 加压:当电泳降至每板胶 3 mA 以下时,升高电压至 500 V,继续电泳 1.5 小时傍边。
5. 电泳降至每板胶 3 mA 以下时,堵截电源界限电泳。
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